Autoria de: Paulo de Jesus Trindade Moreira
Trabalho de Conclusão de Curso apresentado a Faculdade Integrada Brasil Amazônia, como requisito parcial para obtenção do título de Bacharel em Biomedicina
Orientação de: Prof. Dr. Tarcísio André Amorim de Carvalho
RESUMO
Sistema CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/ Associated Proteins), é um mecanismo biológico originário do sistema imune-adaptativo de procariontes que atua como a mais poderosa ferramenta de edição genômica já desenvolvida pelo homem. Com grande potencial para editar com precisão sequências específicas do DNA de qualquer organismo pela ação exclusiva de somente 3 compostos moleculares: a nuclease Cas9, responsável pela clivagem do DNA dupla fita; o sgRNA (single guide-RNA), que leva o complexo até a sequência-alvo; e o DNA de interesse. Foi realizada uma revisão de literatura de natureza descritiva e exploratória sobre o sistema CRISPR/Cas9 e o seu potencial terapêutico por meio da edição genômica. A pesquisa foi baseada em publicações entre o período de 2010 a 2019 e para a seleção dos artigos, foram usadas as seguintes bases de dados: LILACS- Literatura Latino-Americana e do Caribe em Ciências da Saúde, SCIELO - Scientific Eletronic Library on-line, MEDLINE-BVS- Biblioteca Virtual em Saúde e PUB MED. Para a busca dos artigos foram utilizadas palavras-chaves em português e inglês em combinação aos seguintes descritores: Sistema CRISPR-Cas9; Biologia molecular, Terapia gênica, Genic therapy. Por ser essa técnica ainda pouco explorada no meio acadêmico, esta pesquisa tem como objetivo conhecer e informar o potencial terapêutico do sistema CRISPR como ferramenta de edição genética capaz de viabilizar os processos em terapia gênica. Dada sua grande importância para a medicina genômica, para a indústria e outras áreas afins, é de grande valia que esse conhecimento seja cada vez mais entendido e compartilhado. As pesquisas de buscas levantaram 3.478 artigos e destes, 78 foram selecionados por contemplar o tema abordado, sendo que apenas 49 foram usados para compor o trabalho. Os resultados apontados nesta pesquisa mostraram que nos últimos 4 anos essa ferramenta tem sido amplamente utilizada nas configurações pré-clínicas, para correção, silenciamento ou reativação de genes mutados e/ou ativadores transcricionais em células humanas ou modelos animais, apresentando resultados surpreendentes em doenças como, AIDS/HIV, Cardiomiopatia hipertrófica, Distrofia muscular de Duchenne, Câncer, Anemia falciforme, Talassemias, dentre outras. A pesquisa demonstrou que o câncer possui a maior demanda de ensaios clínicos em curso (64,5%), contra cerca de 8% em doenças monogênicas. Os EUA apresentam os maiores números de casos clínicos aprovados (62,9) e em segundo lugar está o Reino Unido com cerca de 11,9%. Um estudo publicado em 2011 demonstrou que o DNA do HIV-1 pode ser extirpado dos genomas de animais vivos. Nos ensaios foi direcionada a Cas9 para a região LTR de linfócitos infectados que após reconhecer o genoma viral o eliminou, obtendo sucesso em 95% dos experimentos. A pesar do sucesso desses ensaios, ainda serão necessários maiores avanços no desenvolvimento de protocolos seguros e melhores vetores de entrega do componente. Todavia, os dados analisados evidenciaram que a terapia gênica por CRISPR pode se tornar uma opção terapêutica efetiva para doenças genéticas ou adquiridas, beneficiando uma infinidade de portadores de diversas enfermidades, para as quais os métodos terapêuticos atuais são ineficazes ou inexistentes.